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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：小鼠終板軟骨細胞

英文名稱：Mouse Endplate Chondrocyte Cells

組織來源：椎間盤

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

小鼠終板軟骨分離自椎間盤終板軟骨組織；椎體終板是椎體在生長發(fā)育過程中，椎體上下面的骨骺板骨化停止后形成骨板，呈輕度凹陷，即為骨性終板。椎體終板的中央仍為一薄層透明軟骨覆蓋，并終生存在，即為軟骨終板，上下軟骨終板與髓核和纖維環(huán)連接共同構(gòu)成椎間盤。椎體終板構(gòu)成了椎間盤的上下邊界，位于椎體中心的松質(zhì)骨和椎間盤之間。是由軟骨下骨和厚度相當?shù)母采w其上的軟骨組成。主要作用是防止椎間盤髓核組織嵌入椎體，同時具有平衡分散應(yīng)力的作用。成熟的終板軟骨細胞多2-8個成群分布于軟骨陷窩內(nèi)，這些終板軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成，稱為同源細胞群。電鏡下，終板軟骨細胞有突起和皺褶，細胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達的高爾基復合體及少量的線粒體。在組織切片中，終板軟骨細胞收縮為不規(guī)則形，在軟骨囊和細胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的終板軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

實驗室分離的小鼠終板軟骨采用膠原酶 - 聯(lián)合消化并結(jié)合軟骨細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

實驗室分離的小鼠終板軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

包被條件：

培養(yǎng)基：含FBS、EGF、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每3-4天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：梭形、多角形

傳代特性：可傳2-3代左右

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠終板軟骨體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細胞結(jié)合緊密，不利于各個細胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。

大鼠4-羥基壬烯酸(HNE)檢測試劑盒 ，英文名： HNE ELISA Kit

Mouse maix metalloproteinase inhibitor 2 (TIMP-2) ELISA Kit 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)檢測試劑盒

Mouseypsinogenactivationpeptide,TAPELISAKit 小鼠原激活肽(TAP)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumaeninELISAKit人腎素

通用型豬口蹄疫(footandmohdisease;FMD)試劑盒20次

ELISAKitBNP大鼠腦素/腦尿肽

HAVCR1重組食蟹猴 KIM-1 / TIM1 / HACVR1 蛋白 Protein

Mtp53(Mutant type p53 0.5mgMtp53(Mutant type p53) 突變型P53抗原

YES1重組人 c-Yes / YES1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

ECSIT Protein Human 重組人 ECSIT 蛋白

AGRP Protein Mouse 重組小鼠 AGRP 蛋白 (Fc 標簽)

Mtp53(Mutant type p53 0.5mgMtp53(Mutant type p53) 突變型P53抗原

ECSIT Protein Human 重組人 ECSIT 蛋白

HAVCR1重組食蟹猴 KIM-1 / TIM1 / HACVR1 蛋白 Protein

AGRP Protein Mouse 重組小鼠 AGRP 蛋白 (Fc 標簽)

YES1重組人 c-Yes / YES1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

小鼠巨噬細胞性蛋白5(MIP-5)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human chorionic gonadoopin (HCG) ELISA Kit 人絨毛膜(HCG)檢測試劑盒

HumanHelicalPeptideELISAKit 人螺旋肽(HelicalPeptide)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanAnnexinⅤ,ANX-Ⅴ檢測試劑盒人膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物胱(cystine)含量比色法定量檢測試劑盒20次

Humanβ2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M,β2-GP1IgA/G/MELISAKit人β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1IgA/G/M)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠終板軟骨細胞小鼠鈣通道阻滯劑檢測試劑盒   小鼠鈣通道阻滯劑試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠鈣通道阻滯劑試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠鈣通道阻滯劑試劑盒、小鼠鈣通道阻滯劑eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠分泌型免疫球蛋白檢測試劑盒   小鼠分泌型免疫球蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠分泌型免疫球蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠分泌型免疫球蛋白試劑盒、小鼠分泌型免疫球蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠分泌型0脂酶檢測試劑盒   小鼠分泌型0脂酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠分泌型0脂酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠分泌型0脂酶試劑盒、小鼠分泌型0脂酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子檢測試劑盒   小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：檢測試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子試劑盒、小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。

本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用