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產(chǎn)品名稱：兔表皮角化上皮細(xì)胞
產(chǎn)品特點(diǎn)：兔表皮角化上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品RAW 264.7(小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞) tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4B3(含10mL酶解緩沖液) 1mL 大鼠腎系膜細(xì)胞;RMC HeLa人細(xì)胞 Human cervix cancer HeLa
產(chǎn)品型號(hào)：
更新日期：2024-12-12
訪問(wèn)次數(shù)：327
兔表皮角化上皮細(xì)胞的詳細(xì)資料：
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
兔表皮角化分離自皮膚組織；表皮位于動(dòng)物皮膚的外層，由胚胎時(shí)期外胚層形成，具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu)，由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層，即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。表皮角化細(xì)胞（KC）是構(gòu)成表皮的主要細(xì)胞成分，在體內(nèi)處于不斷增殖過(guò)程中，分裂的角化細(xì)胞主要位于其基底層，少數(shù)位于棘細(xì)胞層。隨著向表層的推移，細(xì)胞的分化程度逐漸增加，并喪失分裂活性。
產(chǎn)品名稱 | 兔表皮角化上皮細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 皮膚 |
英文名稱 | Rabbit Epidermal keratinized epithelial Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔表皮角化上皮先消化、后-膠原酶混合消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)室分離的兔表皮角化上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳1-3代左右；2代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔表皮角化上皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
注意事項(xiàng)：
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 。
9.注意： 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品：
兔子層連蛋白/板層素(LN)ELISA 試劑盒
Human vascular endothelial cell growth factor C (VEGF-C) ELISA Kit 人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)檢測(cè)試劑盒
Humanai-gangliosideaibody,GM1ELISAKit 人抗抗體(GM1)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanErythropoietin,EPO檢測(cè)試劑盒人紅細(xì)胞生成素(EPO)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織RSK3激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
HumanOsteogenicGrowthPeptide，OGPELISAKit人成骨生長(zhǎng)肽(OGP)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
CD86重組大鼠 CD86 / B7-2 蛋白 Protein
HIV gp120 艾滋病病毒(抗原 0.5mgHIV gp120 艾滋病病毒(抗原)
HSPD1重組人 HSPD1 / HSP60 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
IL27 Protein Human 重組人 IL27 / Interleukin-27 蛋白
HDAC8 Protein Mouse 重組小鼠 HDAC8 / HDACL1 蛋白
HIV gp120 艾滋病病毒(抗原 0.5mgHIV gp120 艾滋病病毒(抗原)
IL27 Protein Human 重組人 IL27 / Interleukin-27 蛋白
CD86重組大鼠 CD86 / B7-2 蛋白 Protein
HDAC8 Protein Mouse 重組小鼠 HDAC8 / HDACL1 蛋白
HSPD1重組人 HSPD1 / HSP60 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
豚鼠干擾素α(IFNα)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： IFNα ELISA Kit
Calcium channel aibody (VGCC) ELISA Kit 人鈣離子通道抗體(VGCC)檢測(cè)試劑盒
RabbitCoisolELISAKit 兔子(Coisol)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforBA(HumanBlockingaibody)ELISAKit人封閉抗體
線蟲(chóng)基因組DNA分離試劑盒20次
Rabbitbonemorphogeneticproteins,BMPsELISAKit兔骨形成蛋白(BMPs)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔表皮角化上皮細(xì)胞人轉(zhuǎn)鐵蛋白（F）檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1(ATF-1)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(T)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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