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產(chǎn)品名稱：人表皮成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品特點：人表皮成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品HEC-1-A(人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞) CL-0410P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤細(xì)胞) 獼猴皮膚細(xì)胞;MMS7 HFSF細(xì)胞，人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞 啤酒酵母 小鼠髖動脈內(nèi)皮細(xì)胞;PIEC TIGIT Others Human 人 TIGIT / VSTM3
產(chǎn)品型號：
更新日期：2024-12-11
訪問次數(shù)：340
人表皮成纖維細(xì)胞的詳細(xì)資料：
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細(xì)胞簡介：
人表皮成纖維分離自皮膚組織；表皮位于動物皮膚的外層，由胚胎時期外胚層形成，具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu)，由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層，即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
產(chǎn)品名稱 | 人表皮成纖維細(xì)胞 | 組織來源 | 皮膚組織 |
英文名稱 | 詳見說明書 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
方法簡介：
公司實驗室分離的人表皮成纖維采用先消化、后-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人表皮成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
注意事項：
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 。
9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人總膽汁酸(TBA)檢測試劑盒
People of heterogeneous ribonucleoprotein complex (hNP/RA3 / ai RA33 aibody 人異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33抗體(hNP/RA3
HumangranzymesA,Gzms-AELISAKit 人顆粒酶A(Gzms-A)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanheparinsulphateprotoglycans,HSPG檢測試劑盒人肝素糖蛋白(HSPG)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
組織元素比色法定量檢測試劑盒20次
HumanmajorhistocompatibilitycomplexⅡ,MHCⅡ/HLA-ⅡELISAKit人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
TGFBR3重組小鼠 TGFBR3 / Betaglycan 蛋白 Protein
免疫球蛋白G(IgG)天然蛋白 Native Immunoglobulin G (IgG)
KDM1A重組人 KDM1 / LSD1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
CDH17 Protein Human 重組人 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 蛋白
TDGF1 Protein Rat 重組大鼠 Cripto / TDGF1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
免疫球蛋白G(IgG)天然蛋白 Native Immunoglobulin G (IgG)
CDH17 Protein Human 重組人 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 蛋白
TGFBR3重組小鼠 TGFBR3 / Betaglycan 蛋白 Protein
TDGF1 Protein Rat 重組大鼠 Cripto / TDGF1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
KDM1A重組人 KDM1 / LSD1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
小鼠細(xì)胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human lymphocyte factor ELISA Kit 人淋巴細(xì)胞因子檢測試劑盒
Humanα-enolaseELISAKit 人α烯醇化酶(α-enolase)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Chickeninfectiouscoryza,ic檢測試劑盒雞傳染性鼻抗體(IC)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞CYTOCHROMEC蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次
MousegranzymesB,Gzms-BELISAKit小鼠顆粒酶B(Gzms-B)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T
人表皮成纖維細(xì)胞小鼠心肽(ANP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPAR-γ)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠毒性休克綜合征毒素1(TSST-1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠A(CsA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
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