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本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):

1.操作簡(jiǎn)便、快捷。可直接加入到檢測(cè)平板。在96-孔板中檢測(cè)時(shí),無(wú)需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。

2. 無(wú)放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來(lái)溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。

商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱：Human FasL Protein, His-SUMO tag (Animal-Free)

產(chǎn)品中文名稱：重組人Fas配體,His-SUMO標(biāo)簽無(wú)動(dòng)物源FasL

規(guī)格：5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

貨號(hào)：EY-01X8893
用途：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

特點(diǎn)&優(yōu)勢(shì):

表達(dá)宿主:大腸桿菌

種屬:人

序列:氨基酸序列來(lái)源于：人源FasL Protein (Gln130-Leu281) (P48023-1)

活性:Measure by its ability to induce apoptosis in Jurkat cells. The ED?? for this effect is <1 ng/mL. The specific activity of recombinant human FasL is > 1 x 10? IU/mg.

蛋白長(zhǎng)度：重組人FasL 蛋白由1

背景

Fas Ligand (FasL) is a 17.34 kDa tumor necrosis factor with 152 amino acid residues. FasL is expressed from lymphoid tissue and secreted to blood. Binding to its receptor, TNFRSF6/FAS, leads to induce apoptotic signal into cells. Involved in cytotoxic T-cell-mediated apoptosis, natural killer cell-mediated apoptosis and in T-cell development.

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過(guò)PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過(guò)RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體

1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測(cè)序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。

(四)誘導(dǎo)表達(dá)

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過(guò)夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過(guò)夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對(duì)照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。

公司正在出售的產(chǎn)品：

CGRP (calcitonin gene related peptide, CGRP 0.5mgCGRP (calcitonin gene related peptide, CGRP) 降鈣素基因相關(guān)肽

CCL7 Protein Human 重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白

CD28重組小鼠 CD28 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

MBL1 Protein Mouse 重組小鼠 MBL1 蛋白

CMBL重組人 CMBL 蛋白 Protein

小鼠乙型肝表面抗原(HBsAg)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human soluble cluster of differeiation 21 (CR2/sCD21) ELISA Kit 人可溶性白細(xì)胞分化抗原21(CR2/sCD21)檢測(cè)試劑盒

Humancytokeratin20,CK-20ELISAKit 人細(xì)胞角蛋白20(CK-20)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor6-keto-PGF1aELISAKit大鼠6同前列腺素F1a

飲料D-乳酸比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Mousemajorhistocompatibilitycomplex-Ⅱ,MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISAKit小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

血管緊張素1   英文名稱：   Human Angiotensin 1   規(guī)格：      英文縮寫：   AT1

血管緊張素2受體1抗體   英文名稱：   Human Angiotensin 2 receptor 1 aibody   規(guī)格：      英文縮寫：   AT2R1-Ab

血管緊張素2受體1型   英文名稱：   Human Angiotensin 2 receptor Type 1   規(guī)格：      英文縮寫：   AG2

血管緊張素2   英文名稱：   Human Angi

大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： SP-C ELISA Kit

Porcine macrophage inflammatory protein 1 alpha (MIP-1 alpha /CCL3) ELISA Kit 豬巨噬細(xì)胞性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)檢測(cè)試劑盒

轉(zhuǎn)基因植物PRSV基因核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T

CLIAKitforMAPKAPK3(Humanmitogen-activatedproteinkinase-activatedproteinkinase3)ELISAKit人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3

體液氧化應(yīng)激活性氧(ROS)魯米諾化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒50次

ELISAKitMrNV羅氏沼蝦諾達(dá)病毒

重組人Fas配體,His-SUMO標(biāo)簽無(wú)動(dòng)物源FasLBGN重組小鼠 Biglycan / PG-S1 / BGN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

肝脂酶(LIPC)重組蛋白 Recombinant Lipase, Hepatic (LIPC)

PDHA1重組人 PDHA1 / C54G1 蛋白1 (aa 30-390) Protein

CCL7 Protein Human 重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白

THPO Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白

適用于人類或臨床診斷