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產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱：Human FGF21 protein

產(chǎn)品中文名稱：重組人成纖維細(xì)胞生長因子21（FGF21）

規(guī)格：5 μg/50 μg/500 μg

貨號：EY-01X8664
用途：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

特點(diǎn)&優(yōu)勢:

標(biāo)簽:無標(biāo)簽

表達(dá)宿主:大腸桿菌

種屬:人

序列:氨基酸序列來源于： 人源 FGF21(Q9NSA1)(His29-Ser209) 表達(dá)的蛋白片段。

蛋白長度：重組人成纖維細(xì)胞生長因子21由181個(gè)氨基酸組成，在還原條件下的SDS-PAGE中，它的條帶與理論分子量一致，為19.4 kDa。

純度:≥ 98 % ，使用SDS-PAGE檢測

采用 LAL 法檢測，每 1 μg 蛋白質(zhì)中的 EU 含量小于 1.0。

產(chǎn)品形式:凍干粉，凍干緩沖液為無菌的 150mM NaCl 20mM Tris , pH 8.0動?動

背景

成纖維細(xì)胞生長因子 21 (FGF21) 是屬于 FGF 家族的生長因子。 這個(gè)家族的蛋白質(zhì)具有廣泛的促有絲分裂和細(xì)胞存活活性:，并參與各種生物過程，包括胚胎發(fā)育、細(xì)胞生長、形態(tài)發(fā)生、組織修復(fù)、腫瘤生長和侵襲。 FGF 通過4個(gè)FGF受體家族成員發(fā)揮作用。FGF 分子與 FGF 受體相互作用再通過肝素結(jié)合域與肝素結(jié)合。 內(nèi)分泌 FGF 缺乏肝素結(jié)合域，因此可以釋放到循環(huán)。FGF21 通過 FGF21 受體之一起作用需要與共受體β-klotho相互作用。

本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):

 1.操作簡便、快捷。可直接加入到檢測平板。在96-孔板中檢測時(shí),無需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。

2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。
公司正在出售的產(chǎn)品：

Bcl2樣蛋白11(BCL2L11)重組蛋白 Recombinant Bcl2 Like Protein 11 (BCL2L11)

CCL8 Protein Human 重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標(biāo)簽)

HPGD重組小鼠 HPGD / 15-PGDH 蛋白 Protein

IL6ST Protein Rat 重組大鼠 gp130 / IL6ST / CD130 蛋白

TMED1重組人 TMED1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

小鼠乙型肝e抗體(HBeAb)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human soluble cluster of differeiation 38 (sCD38) ELISA Kit 人可溶性白細(xì)胞分化抗原38(sCD38)檢測試劑盒

HumanHelicobacterpyloriIgM,Hp-IgMELISAKit 人幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor5-(Human5-Nucleotidase)ELISAKit人5核苷酸酶

飲料阿斯巴塘(aspaame)含量薄層色譜法定性檢測試劑盒20次

MouseMacrophageInflammatoryProtein3α,MIP-3αELISAKit小鼠巨噬細(xì)胞性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

溴化乙錠   1g

EthidiumBromide(EB)   1ml(10mg/ml)

乙二醇   500ml

Ethyleneglycol

大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D(SP-D)檢測試劑盒 ，英文名： SP-D ELISA Kit

Porcine keratinocyte growth factor (KGF) ELISA Kit 豬角化細(xì)胞生長因子(KGF)檢測試劑盒

轉(zhuǎn)基因植物cry1A基因核酸檢測試劑盒 48T

CLIAKitforMA/Melan-A(HumanMelanomaMarkerA)ELISAKit人黑色素瘤標(biāo)記物

體液氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)熒光測定試劑盒50次

ELISAKitPP裸鼠蛋酸酶

重組人成纖維細(xì)胞生長因子21（FGF21）CHODL重組小鼠 CHODL / Chondrolectin 蛋白 Protein

Smad同源物7(Smad7)重組蛋白 Recombinant Mothers Against Decapentaplegic Homolog 7 (Smad7)

CNPY2重組人 CNPY2 蛋白 Protein

CCL8 Protein Human 重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標(biāo)簽)

NOV Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV 蛋白

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體

1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。

(四)誘導(dǎo)表達(dá)

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。