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小鼠結(jié)締組織細(xì)胞胸苷激酶缺陷株；L-M(TK-)保存在運(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái)，因此客戶在收到貨以后的*時(shí)間是要先觀察產(chǎn)品的狀況，顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí)，請(qǐng)不要立即打開(kāi)培養(yǎng)瓶，應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱過(guò)夜，并于次日在顯微鏡下觀察，此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞仍不能貼壁，請(qǐng)?jiān)囍门_(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請(qǐng)按懸浮細(xì)胞的方法處理；如若證實(shí)細(xì)胞無(wú)活力，請(qǐng)?jiān)谑盏截浐?8小時(shí)內(nèi)將細(xì)胞狀態(tài)反饋給我公司，我們將盡快幫助解決。

細(xì)胞名稱  小鼠結(jié)締組織細(xì)胞胸苷激酶缺陷株；L-M(TK-)保存
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)

特征特性 L-M (TK-)細(xì)胞是L-M（ATCC CCL-1.2 ）細(xì)胞系的衍生株，具有抗5-溴脫氧尿核苷（5-bromo-2-deoxyuridine,BUdR）、缺乏胸腺嘧啶核苷激酶（thymidine kinase mutant）的特性，廣泛用于遺傳學(xué)、生物化學(xué)基礎(chǔ)研究。也可用在體細(xì)胞雜交、基因轉(zhuǎn)移等實(shí)驗(yàn)研究中。

培養(yǎng)條件 DMEM-H：

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Gl
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．小鼠結(jié)締組織細(xì)胞胸苷激酶缺陷株；L-M(TK-)保存培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
注意事項(xiàng)：
1.收到小鼠結(jié)締組織細(xì)胞胸苷激酶缺陷株；L-M(TK-)保存后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)絡(luò)。
2.收到細(xì)胞先不開(kāi)瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)（視細(xì)胞密度而定）穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐ＷC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài)，故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問(wèn)題后客服人員溝通的時(shí)間證明，期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
本公司代理ATCC細(xì)胞，提供小鼠結(jié)締組織細(xì)胞胸苷激酶缺陷株；L-M(TK-)保存售前售后一條龍服務(wù)，若要獲取詳細(xì)的說(shuō)明書(shū)或價(jià)格信息，點(diǎn)擊了解更多小鼠源細(xì)胞。

質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRN-Succinimidyl7-Methoxycoumarin-3-carboxylateN-琥珀酰亞胺基-7-甲氧基-3-羧酸酯(>98.0%(HPLC)(N))

質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRN-Succinimidyl7-Hydroxycoumarin-3-carboxylateN-琥珀酰亞胺基-7-羥基香-3-羧酸酯(>95.0%(HPLC)(T))

質(zhì)量規(guī)格：>98%,BCN-Methyl-d-AsparticAcidN-甲基-D-天

質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRN-Methyl-N-(trimethylsilyl)acetamideN-甲基-N-(*基硅基)乙酰胺(97%)

質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRN-Methyl-N-TMS-acetamideN-甲基-N-*硅基乙酰胺(>92.0%(GC))

質(zhì)量規(guī)格：>98%(HPLC),USPN-MethylDesloratadineN-甲基地

質(zhì)量規(guī)格：>98%,水合物N-MethylDuloxetineN-甲基度洛西汀

質(zhì)量規(guī)格：>98%，BCN-MethylfurohydroxamicAcidN-甲基糠酰羥肟酸(>99.0%(HPLC))

pGL4.17PolymyxinBSulfateSolution200U

pGL4.17[luc2/Neo]PolynucleotidePhosphorylase200U

pGL4.18[luc2P/Neo]PolyphenolOxidase(Mushroom)200U

pGL4.19[lucCP/Neo]Polyvinylpolypyrrolidone（PVPP）200U

pGL4.19Polyvinylpyrrolidone(PVPK-30)200U

pGL4.20Polyvinylpyrrolidone(PVPK360)200U

pGL4.26Polyvinylpyrrolidone(PVP40000)200U

pAd/PL-DEST（骨架載體）PonceauS200U

pGL4.29PonceauSBlotStain200uL

pAD43-25pOPI3CAT200次

pGL4.30POPOP（1,4-Bis(5-phenyl-2-oxazolyl)benzene）200次

pGL4.74pOPRSVI200次

pGL4.75pOPRSVI/MCS200次

pGL4.75[hRluc/CMV]POPSOBuffer，0.2M,pH7.0200次

pGL5luciPOPSOBuffer，0.2M,pH7.4200次
小鼠結(jié)締組織細(xì)胞胸苷激酶缺陷株；L-M(TK-)保存CA IX  酶9多克隆抗體     0.1ml

CA XI/Carbonic Anhydrase XI  酶11多克隆抗體     0.2ml

CA12  酶12多克隆抗體     0.1ml

CA125/MUC16  卵巢癌抗原多克隆抗體     0.1ml

CA13  酶     0.2ml

CA153/EMA/Mucin 1  癌相關(guān)抗原多克隆抗體     0.1ml

CA153/EMA/Mucin-1 subunit alpha  癌相關(guān)抗原多克隆抗體     0.1ml

CA15-3/Muc1  粘蛋白-1/上皮膜抗原多克隆抗體     0.1ml

CA153/MUC1/KL-6  癌相關(guān)抗原多克隆抗體     0.1ml

CA6  酶6多克隆抗體     0.2ml

CA7  酶7多克隆抗體     0.2ml

CA8  酶相關(guān)蛋白8多克隆抗體     0.2ml