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人膀胱癌細(xì)胞；J82運(yùn)輸在運(yùn)輸?shù)倪^程中，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來，因此客戶在收到貨以后的*時(shí)間是要先觀察產(chǎn)品的狀況，顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí)，請(qǐng)不要立即打開培養(yǎng)瓶，應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱過夜，并于次日在顯微鏡下觀察，此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞仍不能貼壁，請(qǐng)?jiān)囍门_(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請(qǐng)按懸浮細(xì)胞的方法處理；如若證實(shí)細(xì)胞無活力，請(qǐng)?jiān)谑盏截浐?8小時(shí)內(nèi)將細(xì)胞狀態(tài)反饋給我公司，我們將盡快幫助解決。

細(xì)胞名稱  人膀胱癌細(xì)胞；J82運(yùn)輸
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)

特征特性 該細(xì)胞源自一名58歲患有膀胱移行細(xì)胞癌的白人男性。胞內(nèi)無橋粒，有大量粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及突出絨毛，表達(dá)ras基因。

培養(yǎng)條件 MEM-EBSS：

Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS  

傳代方法 1:2～1:10傳代，每周換液2～3次

傳代情況 P62

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．人膀胱癌細(xì)胞；J82運(yùn)輸培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號(hào)16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
注意事項(xiàng)：
1.收到人膀胱癌細(xì)胞；J82運(yùn)輸后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)絡(luò)。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)（視細(xì)胞密度而定）穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐ＷC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài)，故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時(shí)間證明，期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
本公司代理ATCC細(xì)胞，提供人膀胱癌細(xì)胞；J82運(yùn)輸售前售后一條龍服務(wù)，若要獲取詳細(xì)的說明書或價(jià)格信息，點(diǎn)擊了解更多腫瘤細(xì)胞。500克Yeast extract酵母浸膏

25克Bile salt No. 33號(hào)膽鹽

25克Bile salt No. 55號(hào)膽鹽

25克Bile salt No.77號(hào)膽鹽

25克Bile salt from sheep羊膽鹽

25克Bile salt from ox牛膽鹽

1公斤

WT-1/Wilms Tumor Protein  腎母細(xì)胞瘤蛋白抗體   規(guī)格 0.1ml*

WSTF  轉(zhuǎn)錄因子WSTF抗體   規(guī)格 0.2ml*

WSB2/WD SOCS box protein 2  信號(hào)傳導(dǎo)抑制蛋白WD重復(fù)蛋白2抗體   規(guī)格 0.2ml*

WRCH-1  WRCH1抗體   規(guī)格 0.1ml*

WNT9A  信號(hào)通路Wnt9a抗體   規(guī)格 0.1ml*

Wnt8b  WNT蛋白家族Wnt8b抗體   規(guī)格 0.2ml*

Wnt8A  信號(hào)通路WNT8A抗體   規(guī)格 0.2ml*

WNT7B  Wnt蛋白家族7B抗體   規(guī)格 0.2ml*

WNT7A  原癌基因wnt7a蛋白抗體   規(guī)格 0.1ml*

Wnt6  信號(hào)通路Wnt6抗體   規(guī)格 0.2ml*

WNT5A  信號(hào)通路Wnt5a抗體   規(guī)格 0.1ml*

WNT4  信號(hào)通路Wnt4抗體   規(guī)格 0.2ml*
人膀胱癌細(xì)胞；J82運(yùn)輸OTOA/DFNB22  耳聾、常染色體隱性遺傳22多克隆抗體   規(guī)格 0.2ml*

OTC  氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶多克隆抗體   規(guī)格 0.1ml*

OSTM1  骨硬化病相關(guān)跨膜蛋白1多克隆抗體   規(guī)格 0.2ml*

Osterix  成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子多克隆抗體   規(guī)格 0.1ml*

OST-beta  有機(jī)溶質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白OSTβ多克隆抗體   規(guī)格 0.2ml*

OSMR/OSMRB  抑瘤素M受體多克隆抗體   規(guī)格 0.1ml*

OSM/Oncostatin M  抑瘤素M多克隆抗體   規(guī)格 0.1ml*

OSGIN1  氧化應(yīng)激誘導(dǎo)生長(zhǎng)抑制因子1多克隆抗體   規(guī)格 0.2ml*

OS9  OS-9蛋白多克隆抗體   規(guī)格 0.2ml*

Os05g0477200 protein  水稻白葉枯病菌Os05g0477200蛋白多克隆抗體   規(guī)格 1ml*

ORP8  氧化固醇結(jié)合蛋白8多克隆抗體   規(guī)格 0.2ml*

ORP4/OSBP2  氧化固醇結(jié)合蛋白4多克隆抗體   規(guī)格 0.2ml*