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細胞簡介：

腎是脊椎動物的一種器官，屬于泌尿系統(tǒng)的一部分，負責(zé)過濾血液中的雜質(zhì)、維持體液和電解質(zhì)的平衡，后產(chǎn)生尿液經(jīng)尿道排出體外；同時也具備的功能以調(diào)節(jié)血壓。用顯微鏡觀察，可見到每一個腎臟主要由約 100萬個具有相同結(jié)構(gòu)與機能的腎單位和少量結(jié)締組織所組成，其間有大量血管和神經(jīng)纖維。

細胞特性：

1） 細胞來源于動物正常腎組織。

2) 廣譜角蛋白（PCK）或細胞角蛋白-19（CK-19）熒光染色為陽性。

3) 經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5) 細胞生長方式：圓形，多角形細胞，貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基：

我們推薦使用 delf原代 上皮 細胞培養(yǎng)體系 作為該細胞的培養(yǎng)試劑。

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠白介素4(IL-4)檢測試劑盒 ，英文名： IL-4 ELISA Kit

Mouse ierleukin 2 (IL-2) ELISA Kit 小鼠白介素2(IL-2)檢測試劑盒

ELISA 小鼠熱休克蛋白70(mouse HSP70)  進口分裝

CLIAKitforiNOSELISAKIT大鼠誘導(dǎo)型合成酶

通用型甘油三酯(iglyceride)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒20次

ELISAKitPGR大鼠孕同受體

OLR1重組食蟹猴 OLR1 / LOX1 蛋白 Protein

Maspin (mammary serine protease inhibitor 0.5mgMaspin (mammary serine protease inhibitor) 抑癌基因抗原

STK4重組人 STK4 / MST1 蛋白 Protein

EPHB2 Protein Human 重組人 EphB2 / Hek5 蛋白

TEK Protein Mouse 重組小鼠 Tie2 / TEK 蛋白

Maspin (mammary serine protease inhibitor 0.5mgMaspin (mammary serine protease inhibitor) 抑癌基因抗原

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TEK Protein Mouse 重組小鼠 Tie2 / TEK 蛋白

STK4重組人 STK4 / MST1 蛋白 Protein

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat soluble vascular cell adhesion molecule 1 (sVCAM-1) ELISA Kit 大鼠可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)檢測試劑盒

Humanconnectivetissue-activatingpeptideⅢ,CTAPⅢELISAKit 人結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-immunodeficiencyvirusaibody,HIV檢測試劑盒人抗人類免疫缺陷病毒抗體(HIV)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物硫酸酶(rhodanase)活性比色法定量檢測試劑盒20次

HumanVascularEndothelialcellGrowthFactor，VEGFELISAKit人血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠腎上皮細胞小鼠白介素-9   英文名稱：    ierleukin-9   規(guī)格：      英文縮寫：   IL-9

小鼠白介素-10   英文名稱：    ierleukin-10   規(guī)格：      英文縮寫：   IL-10

小鼠白介素-12   英文名稱：    ierleukin-12   規(guī)格：      英文縮寫：   IL-12

小鼠白介素-13   英文名稱：    ierleukin-13   規(guī)格：      英文縮寫：   IL-13