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細(xì)胞簡(jiǎn)介：

甲狀旁腺是和甲狀腺毗鄰的一個(gè)重要的器官，正常人一般是 4個(gè)，但是每個(gè)人由于個(gè)體差異不同，具體的數(shù)目可能有變異。甲狀旁腺主要是分泌甲狀旁腺。

細(xì)胞特性：

1）細(xì)胞來源于人正常甲狀腺旁腺組織。

2）細(xì)胞鑒定：PTH熒光染色為陽性。

3）經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4）不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5）細(xì)胞生長(zhǎng)方式：梭形，多角形細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基：

我們推薦使用 delf原代 上皮 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項(xiàng)：

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠髓鞘關(guān)聯(lián)糖蛋白(MAG)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： MAG ELISA Kit

Mouse glycogen phosphorylase II (GP-II) ELISA Kit 小鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)檢測(cè)試劑盒

raesistinELISAKit 大鼠抵抗素(Resistin)檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHIT(Humanheparinassociatedaibody)ELISAKit人抗肝素PF4復(fù)合物抗體/HIT抗體

細(xì)胞RCT激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKit5-大鼠5核苷酸酶

FCGR2重組小鼠 CD32 / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated Protein

ADAMTS7 peptide/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記整合素樣金屬蛋白酶與1型-7抗原 1mgADAMTS7 peptide/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記整合素樣金屬蛋白酶與1型-7抗原

TFAP2C重組人 TFAP2C / AP2-GAMMA 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

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CD14 Protein Rat 重組大鼠 CD14 蛋白

次0酸核糖基轉(zhuǎn)移酶1(HPRT1)重組蛋白 Recombinant Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase 1 (HPRT1)

FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His & AVI 標(biāo)簽)

S100A9重組小鼠 S100A9 / CAGB / p14 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

IFNAR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 (His 標(biāo)簽)

ALOX15B重組人 ALOX15B / 15 Lipoxygenase 2 蛋白 Protein

小鼠干細(xì)胞因子受體(SCFR)ELISA 試劑盒

Human aquaporin 1 (AQP-1) ELISA Kit 人水通道蛋白1(AQP-1)檢測(cè)試劑盒

HumancoagulationfactorⅧrelatedaigen,FⅧ-AgELISAKit 人Ⅷ相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口分裝

Humanapelin12,AP12檢測(cè)試劑盒人apelin12(AP12)ELISAKi

植物氧化應(yīng)激活性氧(ROS)魯米諾化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒50次

HumaotalproteinS,TPSELISAKit人總蛋白S(TPS)檢測(cè)試劑盒

人甲狀旁腺細(xì)胞小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISAKit   ELISA. 

小鼠脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISAKit   ELISA. 

小鼠交聯(lián)物(PY)ELISAKit   ELISA. 

小鼠骨橋素(OPN)ELISAKit   ELISA.