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① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：小鼠表皮干細(xì)胞

英文名稱：Mouse primary representative skin stem cells

組織來源：皮膚組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

角質(zhì)形成細(xì)胞在基底層有一亞群，即表皮干細(xì)胞，它通過對(duì)稱或不對(duì)稱分裂產(chǎn)生短暫擴(kuò)增細(xì)胞，短暫擴(kuò)增細(xì)胞經(jīng)過幾代擴(kuò)增后便成為終末分化的表皮角質(zhì)細(xì)胞。表皮是一個(gè)可以持續(xù)自我更新的組織，因此表皮干細(xì)胞具有足夠的增殖潛力，表皮干細(xì)胞不僅在體內(nèi)平衡和創(chuàng)傷修復(fù)中其關(guān)鍵作用，而且是腫瘤發(fā)生和基因的主要靶標(biāo)。

細(xì)胞特性：

1）組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常皮膚組織。

2)細(xì)胞鑒定：p63與細(xì)胞角蛋白-14（CK-14）熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：鋪路石狀細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基：

我們推薦使用 DELF原代 角質(zhì)形成 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)基。

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動(dòng)物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴(yán)格無菌

③ 防止機(jī)械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動(dòng)物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細(xì)胞結(jié)合緊密，不利于各個(gè)細(xì)胞在體外培養(yǎng)中生長(zhǎng)繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細(xì)胞解離出來。

(1)懸浮細(xì)胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。

(2)實(shí)體組織材料的分離方法

對(duì)于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機(jī)械分散法

特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。

人β葡萄糖苷酶(β-glucosidase)elisa檢測(cè)試劑盒

鮭魚促胰液素/胰泌素(SCT)elisa檢測(cè)試劑盒

冰凍切片組織TUBULIN蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒

小鼠白蛋白(albumin)elisa檢測(cè)試劑盒

倉鼠丙二醛(MDA)elisa分析檢測(cè)試劑盒

/酵母a-（a-AMYLASE）活性CNPG3比色法定量檢測(cè)試劑盒

人單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠多藥耐藥蛋白1(ABCB1)elisa檢測(cè)試劑盒

血清總鐵結(jié)合能力測(cè)試盒

組蛋白H3樣抗體 Centromeric histone H3-like protein-2

12號(hào)染色體開放閱讀框42抗體 C12ORF42

黑色素瘤生長(zhǎng)刺激活性蛋白α/GROa抗體 GRO Alpha

環(huán)指蛋白165抗體 RNF165

PDZ結(jié)構(gòu)域PDZK3蛋白抗體 PDZD3

PerCP標(biāo)記的標(biāo)記的精酶1抗體 Arginase 1, PerCP conjugated

神經(jīng)細(xì)胞增殖和分化調(diào)控蛋白1抗體 NPDC1

生長(zhǎng)抑制蛋白NDN抗體 Necdin

eIF2Bγ單克隆抗體 EIF2B3

FAM125A蛋白抗體 FAM125A

磷酸化絲/蘇蛋白激酶MAK抗體 phospho-MAK (Tyr159)

磷酸化血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2抗體 phospho-VEGF receptor 2 (Tyr1059)

穿膜蛋白DLK1抗體 DLK1

單絲蛋白激酶1抗體 LIMK1

鋅指蛋白28抗體 ZFP28

鋅指蛋白AN1-D3抗體 ZFAND3

飼料（folic acid）含量微生物比色法定量檢測(cè)試劑盒

大鼠波形蛋白(VIM)elisa生化檢測(cè)試劑盒

VIM ELISA Kit

小鼠表皮干細(xì)胞KLK7ELISAKit

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用