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小鼠α2抗纖溶酶(α2-AP)elisa檢測(cè)試劑盒操作步驟：

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

人乳腺癌細(xì)胞；MDA-MB-231

人乳腺癌細(xì)胞；MDA-MB-435S

人乳腺癌細(xì)胞；MDA-MB-453

人惡性多發(fā)性畸胎瘤細(xì)胞；NTERA-2

人卵巢畸胎瘤細(xì)胞；PA-1

人胰腺癌細(xì)胞；PANC-1

人成骨肉瘤細(xì)胞；Saos-2

人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞；SH-SY5Y

人卵巢腺癌細(xì)胞；SK-OV-3

人骨肉瘤細(xì)胞；U-2 OS [U2OS；U2-OS；U-2OS]

人橫紋肌肉瘤細(xì)胞；A-204

人肺腺癌細(xì)胞；Calu-3

人腎癌Wilms細(xì)胞；G401

人肝癌細(xì)胞；Hep G2 [HepG2]

人急性早幼粒白血病細(xì)胞；HL-60

人骨肉瘤細(xì)胞；HOS

人慢性髓系白血病細(xì)胞；K562

人前列腺癌細(xì)胞；LNCaP

人乳腺癌細(xì)胞；MCF 7B

人急性淋巴母細(xì)胞性白血病細(xì)胞；MOLT-4

人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞；NCI-H209

黑人Burkitt淋巴瘤細(xì)胞；RAJI

人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞；RAMOS

人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞；RAMOS(RA.1)

人腦瘤細(xì)胞；SF126

人腦瘤細(xì)胞；SF763

人腦瘤細(xì)胞；SF767

人皮膚黑色素瘤細(xì)胞；SK-MEL-1

人腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞；SW-13

人結(jié)直腸癌細(xì)胞；T84

人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞；THP-1

人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞；U251

人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞；U937 [U-937]

人胃腺癌細(xì)胞；BGC-823

人低分化肺腺癌細(xì)胞；GLC-82 [GLC82]

人喉癌上皮細(xì)胞；Hep-2

人纖維肉瘤細(xì)胞；HT-1080

人絨癌細(xì)胞；JEG-3

人耐VP16絨癌細(xì)胞株；JEG-3/VP16

白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞；JEG-3/VP16-IL-2

TNFa轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞；JEG-3-VP16-TNFa

人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞；Jurkat, Clone E6-1

人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞；BE(2)-M17

人乳腺癌細(xì)胞；MDA-MB-157

人成骨肉瘤細(xì)胞；MG-63

人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞；NCI-H446

人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞；RPMI-8226 [RPMI8826]

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