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ELISA試劑盒包被條件的優(yōu)化
點(diǎn)擊次數(shù)：1498 更新時間：2016-04-13
ELISA試劑盒包被條件的優(yōu)化：
1.包被液的選擇：一般常用的是pH9.6的碳酸鹽緩沖液，如果包被的抗原在堿性條件下不穩(wěn)定的話，也可以使用pH7.2的磷酸鹽緩沖液。
2.包被濃度的選擇：包被的zui適濃度隨固相載體和包被物的性質(zhì)變化，一般蛋白質(zhì)的包被濃度為1- 5ug/ml，要明確針對特定包被抗原的zui適包被濃度需要通過實(shí)驗(yàn)來確定。
3.包被溫度的選擇：通常是4-8度條件下放置一個晚上或者37度保溫2小時，我們強(qiáng)烈建議4-8度條件下包被，有利于蛋白活性的保持。
4.包被抗原的選擇：可分為天然蛋白、重組蛋白和小分子抗原三大類。小分子抗原比如多肽以及一些小分子有機(jī)化合物，由于分子量太小，往往難于直接吸附在酶標(biāo)板上，一般都先使其與無關(guān)蛋白質(zhì)，比如BSA等偶聯(lián)，偶聯(lián)物吸附于固相載體上。